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電子顯微鏡之原理 發問者：RT ( 初學者 5 級)
發問時間：005-05-0 3:05:43
解決時間：005-05-04 19:55:1
解答贈點：10 ( 共有 0 人贊助 )
回答： 評論： 0 意見： 4
[ 檢舉 ]
網友正面評價
64%
共有 14 人評價請問是否有人能解答關於電子顯微鏡之問題????
可否詳細說明電子顯微鏡是如何利用電子束觀察物體??
又它的透鏡是如何成像的??
如能回答,本人必感激不盡閣下的幫助
謝~
最佳解答發問者自選
回答者：酷大貓 ( 初學者 4 級 )
回答時間：005-05-03 00:33:40
[ 檢舉 ] 電子顯微鏡應用
一、顯微鏡發展史
自古以來，人類對於微小的世界，就一直存有相當的崇敬與好奇心。最初的顯微鏡為放大鏡，也就是單一的凸透鏡。一般者古學家咸信遠在紀元前三千年的兩河流域已有玻璃透鏡的製造。複式顯微鏡以兩個以上的透鏡組合而成，可能是由荷蘭的Hans, Zacha rias jANSEN父子於1590年代所發明。而第一架實用性的光學顯微鏡則由荷蘭的Antonie Van Leeumenhoek於1673年發明，自此光學顯微鏡已帶領人類遊歷了肉眼無法見到的世界，也是使醫學成為科學與藝術的最重要一種工具。顯微鏡其解析力之公式α＝0.61λ／NA，α為解析力，λ為波長，NA為光口角，NA以油鏡最佳直約 1.4，故光學顯微鏡解像力之極限以自然光時為0.5μ，(500A°)以單色4,000A°之光源時為0.17μ。以光學顯微鏡無法區分小於0.μ大小之結構。為了提高解析力以縮短光源之波長為最有效之方法，嘴而發明了紫外線顯微鏡及X光顯微鏡。為了發明此兩種顯微鏡投資了極大的財力與技術，但所提昇之效果極為有限，兩者的解析力之極限均為0.1μ。
二、電子顯微鏡發展史
一般光學顯微鏡受美於光波之波長其解析力之極限約為0.μ，無法滿足人類永無止境探索欲望，因而才有電子顯微境的產一。電子顯微鏡的理論起源於190年代de Broglie 氏首先發表之電子波動說，電磁波之特性與光波極為類似，但波長很短，電磁波波長之公式為 λ＝1.／√V，λ為波長A°，V為加速電壓，當加速電壓為 50,000 V 時波長約為 0.535A°。第一架實用電子的微鏡由德國Ruska於1933年發明，而第一架商用電顯則由德國的Siemens公司於1939年生產。電顯的應用，使科學研究的領域提昇至超顯微的世界，可說是0世紀生物界、醫學界、及科學界最重要的一種發明。也使Ruska先生於1986年得到諾貝爾物理獎。電子顯微鏡的成像原理與光學顯微鏡一致。主要差別是以電磁波取代光波，以電磁鏡取代光學透鏡。為了適應電磁波之特性，電八內部須維持高度真空狀態，附近最好沒有干擾性的磁場。過去幾拾年電子顯微鏡已成為病毒學、生物學、超微結構研究的一種必要工具。
三、本省獸醫界電子顯微鏡之應用歷史
本所為了研究之需要及提昇獸醫界之水準於1980年啟用一台日立H-600之電子顯微鏡，10年來曾支援台大獸醫系、中興大學獸醫系、屏東技術學院獸醫科、養豬科學研究所、台糖畜產研究所、國科會生物組及各地防治所等單位達成其研究之目的。自198年至1991年共檢驗8,068件樣品，並於1988年3月協助國科會生命科學研究推動中心舉辦農學有關電子顯微鏡研習會與實習。屏東技術學院於1985年、養豬科學研究所於1988年皆因本所電顯使用良好各購一台H-600電顯以應其研究之需要。中興大學獸醫系於1991年購買一台Zeiss 300電顯。本所為了提高水準及海外惡性傳染病防治之需要於199年再添購一台H-600超高解析力穿透式顯微鏡與一台S-300掃描式電子顯微鏡，以便充份服務本省獸醫界。
Hitachi : H-600-4穿透式電子顯微鏡 Hitachi : S-300掃描電子顯微鏡
四、電子顯微鏡之應用與成果
病材之負染色法因操作簡單，解析力強，目前一般病材均可利用此法鏡檢，直接依其型態檢出病原達到確診之目的。其操作方法是將樣品以低速及高速遠心純化，利用等量之蒸餾水與％磷鎢酸鉀混合滴於輕Collodion被覆，炭膜蒸鍍之400mesh銅網片上，以濾紙吸乾即可鏡檢，負染色法為目前本所電顯最重要使用項目之，至目前為止發現主要病原依動物區別如下：
牛：流行熱病，丘疹性口炎病，病毒性下痢病，傳染性鼻氣管炎病，乳頭狀瘤病，茨城病，腺病毒及冠狀病毒。
豬：豬瘟病，假性狂太病病，豬痘病毒，巨細胞病毒，腸內病毒，輪狀病毒，傳染性胃腸炎病毒，沙狀病毒，星狀病毒，黴漿菌，豬赤痢弧菌，豬赤痢螺旋體，豬胸膜肺炎放線桿菌，纖毛大腸桿菌。
雞：新城雞瘟病毒，病毒性關節炎病毒，流行性感冒病毒，傳染性支氣管炎病毒，雞傳染性喉頭氣管炎病毒，雞肝炎弧菌，產蛋低下症病毒，雞痘病毒，馬立克病毒，傳染性華氏囊病病毒，腫頭症候群病毒。
其他：犬病毒性腸炎小病毒，犬腺病毒，犬瘟熱病毒，犬傳染性肝炎病毒，鴿痘病毒，鴨病毒性肝炎病毒，鴨流行性感冒病毒，鵝病毒性腸炎小病毒，鴨細小核糖核酸病毒，火雞出血性腸炎病毒，羊關結炎黴漿菌、鼠肝炎病毒。
參考資料
http://www.nvri.gov.tw/veter-info/199/010.htm 相關詞：
電子地圖,電子辭典,全國電子,電子商務,電子襪,奇美電子,電子機票,電子信箱,欣興電子,電子字典
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001
回答者：POSH ( 研究生 5 級 )
回答時間：005-05-0 3:07:33
[ 檢舉 ]
電子顯微鏡技術原理與方法
一般光學顯微鏡雖然理論上利用可見光的純放大倍率可以無限，但因解析力之因素，光學顯微鏡之放大倍率會因波長的影響而受到，其關係如下：α＝0.61λ／NA，α為解析力，ＮＡ為折光係數，以油鏡所得ＮＡ最大可能為1.4，λ為波長，可視光之波長為3000～8000A°，由此公式可推出光學顯微鏡之解析力極限為α＝0.61(4000)／1.4λ＝1700A°（以波長為4000A°單色光之α為0.17μ），一般白色光解析力約為0.5μ；因此實際上以一般光學顯微鏡無法區分小於0.μ之結構。電子顯微鏡之波長與電壓有密切之關係，其公式為λ＝1.／√V，λ為波長單位為Ａ°，Ｖ為加速電壓，當加速電壓為 50000 Ｖ時之解析力約為 .5Ａ°，過去幾拾年穿透式電子顯微鏡已成為病毒學研究的一種重要工具。負染色法因操作簡單，解析力強，可省去許多繁雜費時的標本純化及製備過程。現在任何一種体液皆可利用負染色法鏡檢，直接依型態學檢出病原体而省去以往標本純化等繁雜的定性手續。
負染色電子顯微鏡法除了簡單快速外，且當負染色診斷陽性時，即為確診。例如當水泡液送診時，很快即可因其病毒大小，形狀，而能確診為口蹄疫 (picorna virus) 或丘疹性口炎 (pox virus)，如屬同一類之病毒，例如 picorna virus 之口蹄疫，豬水泡病及水泡病時，可藉免疫負染色法而快速確診。
引起下痢之冠狀病毒，輪狀病毒，腺病毒及星狀病毒也可藉負染色法而快速診斷，其他引起腸炎的腸道小病毒尤其是介於 0～30 nm者，可利用免疫電子顯微鏡法確診，如鴨肝炎病毒，小病毒 (parvo virus)，貓白血病病毒，皆可利用這種方法加以確診。
利用薄切片技術可觀察病毒於組織細胞內增生的情形，但因其操作繁雜，費時，很難應用於常規性的鑑定。因負染色時病毒顆粒之結構較為清楚明顯，且操作簡單快速，故一般病性鑑定皆以負染色法進行。
負染色操作方法：
先以自閉式抗毛細現象之夾子夾住一片鍍有炭膜及膠膜之銅網片，將一滴標本滴於銅網片上，等候一分鐘後再將一滴磷鎢酸染色液滴於銅網片上然後以濾紙吸去過多之液体，等候15至30分鐘使其乾燥後即可利用電子顯微鏡觀察。1
001 意見者：夏哇哇 ( 實習生 5 級 )
發表時間：005-05-04 19:56:44
[ 檢舉 ] 電子顯微鏡的種類那麼多，原理也各不相同...>"
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